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用過(guò)的透析袋保存前需要怎么處理

  • 發(fā)布日期:2022-05-19      瀏覽次數(shù):2196
    •   用過(guò)的透析袋保存前需要怎么處理
        透析袋通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過(guò)程中,除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時(shí)都要用到透析的技術(shù),用過(guò)的透析袋保存前需要怎么處理?
        用生理鹽水浸泡以去掉蛋白,并用蒸餾水清洗干凈,然后置50%乙醇中保存即可;用完以后,要洗干凈,透析袋也可以保存在0.1%疊氮鈉(可防止微生物生長(zhǎng))里;0.05%-0.1%疊氮鈉,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存!
        透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析 袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱(chēng)為"保留液",袋(膜)外的溶液稱(chēng)為"滲出液"或"透析液"。透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析 的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
        透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜, 目前常用的是美國(guó)Union Carbide (聯(lián)合碳化物公司)和美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的各種尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的小分子量,縮寫(xiě)為MwCO)通常為1 萬(wàn)左右。商品透析袋制成管狀,其扁平寬度為23 mm~50 mm不等。為防干裂,出廠時(shí)都用10%的甘油處理過(guò),并含有微量的硫化物(0.1%)、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對(duì)蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害,用前除去。
        透析袋的處理:可先用50%乙醇煮沸1小時(shí),再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,用蒸餾水沖洗即可使用。實(shí)驗(yàn)證明,50%乙醇處理對(duì)除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。若長(zhǎng)時(shí)間不用,可加少量NaN2,以防長(zhǎng)菌。從此 時(shí)起取用透析袋要戴手套。洗凈涼干的透析袋彎折時(shí)易裂口,用時(shí)仔細(xì)檢查,不漏時(shí)方可重復(fù)使用。
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