AAT Bioquest公司7-AAD核酸染料使用說明

AAT Bioquest公司7-AAD產(chǎn)品介紹

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產(chǎn)品描述

7-Aminoactinomycin D，簡稱7-AAD，是一種核酸染料，與DNA結(jié)合后可發(fā)出強(qiáng)烈的熒光，其熒光特性與PI相似，可被488nm氬離子激光激發(fā)，但其發(fā)射光譜較PI窄，且發(fā)射波長更長，對其他檢測通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI的*替代品，可與多種488激發(fā)光激發(fā)的熒光染料聯(lián)合使用，如FITC，PE等。

另外，7-AAD是一種非滲透性熒光染料。該染料不能透過活細(xì)胞的細(xì)胞膜，但可穿透膜損傷細(xì)胞如晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜并與其內(nèi)的DNA結(jié)合，可用來區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞，廣泛用于流式細(xì)胞儀。

運輸和保存方法

室溫運輸，-20℃干燥避光保存。

注意事項

1）7-AAD為潛在致癌物質(zhì)，操作時請穿戴手套、眼罩以及其他防護(hù)措施，以避免接觸皮膚。

2）玻璃器皿上殘留的去垢劑也會影響染色的效果，導(dǎo)致細(xì)胞存在或不存在都會出現(xiàn)強(qiáng)熒光。玻璃器皿的清洗應(yīng)用去垢劑，然后用自來水沖洗數(shù)遍后，用去離子水或蒸餾水漂洗。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注】：該操作說明適用于大多數(shù)細(xì)胞，但不同的細(xì)胞類型、細(xì)胞密度、使用的培養(yǎng)基以及其他一些因素都有可能影響染色效果，本說明僅供參考。

1）儲存液的制備：取適量DMSO加入到7-AAD配制成1-10mM，該儲存液可分裝于-20℃穩(wěn)定保存6個月。

1. ）根據(jù)自身樣本選擇合適的步驟固定細(xì)胞。7-AAD染色一般在其它染色完成后再進(jìn)行，且僅僅染色死細(xì)胞。
2. ）離心收集細(xì)胞，并用合適的的緩沖鹽溶液或者培養(yǎng)基(pH=7.4)重懸細(xì)胞。
3.  
4. ）加入適量7-AAD染色液，推薦該染料的工作濃度為0.5-5µM，孵育15-60min。

【注】：*實驗建議在推薦的工作濃度范圍內(nèi)設(shè)置濃度梯度檢測，從而摸索*的染色濃度。

5）根據(jù)其激發(fā)發(fā)射波長（Ex/Em=545nm/650nm）在流式細(xì)胞儀下(FL3通道)檢測熒光強(qiáng)度。

英文描述：

7-Amino actinomycin D (7-AAD) is a non-permeant dye that can be used to identify non-viable cells. Cells with damaged plasma membranes or with impaired/no cell metabolism are unable to prevent the dye from entering the cell. Once inside the cell, the dyes bind to intracellular DNA producing highly fluorescent adducts which identify the cells as "non-viable". It is widely used in flow cytometry. 7-AAD is excited by the 488 nm laser line of an argon laser with fluorescence detected above 650 nm. Although the emission intensity of 7-AAD is lower than that of PI, the longer wavelength emission may make it more useful for multiplexing assays in combination with other 488 nm-excited Fluorochromes such as FITC and PE.

產(chǎn)品性質(zhì)

英文別名（English Synonym）	7-Aminoactinomycin D； Actinomycin D, 7-amino-
CAS號（CAS NO.）	7240-37-1
分子式（Formula）	C62H87N13O16
分子量（Molecular Weight）	1270.43
外觀（Appearance）	Solid
Ex/Em	546nm/647nm
溶解性（Solubility）	溶于水和DMSO.
結(jié)構(gòu)式（Structure）

Calculators
Common stock solution preparation 
 

Table 1. Volume of DMSO needed to reconstitute specific mass of 7-AAD [7-Aminoactinomycin D] *CAS 7240-37-1* to given concentration. Note that volume is only for preparing stock solution. Refer to sample experimental protocol for appropriate experimental/physiological buffers.

Molarity calculator 
 

Table 2. Enter any two values (mass, volume, concentration) to calculate the third.

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助*的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

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